高效液相色谱法测定支扩养阴颗粒中蒙花苷的含量

  高效液相色谱法测定支扩养阴颗粒中蒙花苷的含量_医药卫生_专业材料。药学实行杂志2012年7月25日第30卷第4期 Journal of Pharmaceutical Practice,V01.30,No 4,July 25,2012 高效液相色谱法测定支扩养阴颗粒!

  药学实行杂志2012年7月25日第30卷第4期 Journal of Pharmaceutical Practice,V01.30,No 4,July 25,2012 高效液相色谱法测定支扩养阴颗粒中蒙花苷的含量 吴文飞,张利斌,李王平f同济大学附庸上海市肺科病院药剂科,上海200433) Platisil [摘要] 4.6 宗旨创造HPLC测定支扩养阴颗粒中蒙花苷的含量步骤。步骤 色谱柱为DIKMA ODS柱(250 ibm× mm,5¨m),滚动相为甲醇一水一醋酸(55:44:2),流速1.0 ml/min,进样量20斗l,检测波长326 tim。结果 蒙花苷正在2.95 —98.3¨g/ml内线%(n=15)。结论 靠,可用于支扩养阴颗粒中蒙化苷的含量测定。 [闭节词] 蒙花苜;小蓟;支扩养阴颗粒;含量测定;高效液相色谱法 R917 该法操作简明、聪慧、可 [中图分类号] [DOI] 10 [文献标记码] A [著作编号] J006—0II I(201 2)04—0307—03 3969/j.issn.1006—0111.2012.04.019 Determination of buddleoside in Zhikuoyangyin granules by HPL C WU Wen—fei,ZHANG Li—bin,LI Yu—pin(Deparlmenl of Pharmacy,Shanghai Pulmonary Hospital Affiliated hai to Tongji University,Shang— 200433,China) [Abstract]0bjective Zhikuoyangyin To establish a high performance liquid chromatography was method for the determination of buddleoside in granules.Methods The HPLC method performed on a DIKMA Platisil ODS rate was column(250 Inm×4.6 mm,5 Ixm) sample with the mobile phase consisting of methanol—water—acetic ame was acid(55:44:2).The flow The calibration 1.0 ml/min.The injection vol— 20 0.1.The detective wavelength to was 326 rim.Results curve of buddleoside showed good was linear response 100.2%while ranged from 2.95 98.3灿g/ml with r=0.999 9 was f n=5).The average recovery of spiked samples for buddleoside The method was the relative standard deviation for repetitions 0.96%(n=15).Conclusion sirepie,sensitive,reliable and re— peatable,and could be used for the quantitative determination of buddleoside in Zhikuoyangyin granules. [Key words] buddleoside;Cirsii herba;Zhikuoyangyin granules;content determination;HPLC 支扩养阴颗粒系本院古代中药制剂,照准文号为 沪药制字Z0418075l,由羊乳根、小蓟、桑白皮、侧柏 (安徽德昌药业饮片有限公司);支扩养阴颗粒(委 托上海练塘药业有限公司配制),甲醇为色谱纯;其 余试剂为领会纯。 2步骤与结果 2.1 tisil 叶、麦冬等十一味药材提取配制而成,具有消炎、化 痰、止血的效劳,能有用息养支气管扩张和影响所引 起的咳嗽、痰众、咯血。本品正在肺科病院息养呼吸道 疾病方面起着了紧要效用,其出产和应用数目逐年递 增。本制剂活性因素中含有黄酮,对此,经试验推敲 色谱条款与编制实用性 ODS柱(250 色谱柱:D1KMA pla— mm×4.6 mm,5 txm);定量环:20 涌现,可能用高效液相色谱法测定出所含抗炎抗菌成 分蒙花苷。本法可行动制剂质料监控项目之一。 l仪器与试药 1.1仪器美邦HP 1100型高效液相色谱仪,蕴涵 手动进样器,单位泵,紫外检测器;N2000色谱丁作 站(浙江大学);色谱柱为DIKMA (250 mm×4.6 Platisil t*1;滚动相:甲醇一水一冰醋酸(55:44:2);流速:1.0 ml/min;检测波长:326 nm;柱温:室温。外面板数按 蒙花苷峰准备应不低于1 2.2溶液的制备 2.2.1 500。1。。 比照品溶液慎密称取蒙花苷比照品10.0 mg,置100 ml量瓶中,用甲醇融化,并稀释定容,按 ODS柱 mm,5“m);BS 210S电子天平(德邦 含量以98.3%计,得98.3 pg/ml的蒙花苷比照品贮 备液,密封,2~8℃冰箱储存。 2.2.2供试品溶液慎密称取支扩养阴颗粒10 g,置 索氏提取器中,用石油醚(60~90℃)100 ml回流2 h, 赛众利斯)。 1.2 试药 蒙花苷比照品(中邦药品生物成品检 定所,批号111528—200606);羊乳根、小蓟等药材 [作家简介] 吴文飞(1964-),女,学士,副主任药师.Tel:(021) com. 弃去醚液,残留物置40 QC恒温箱中止宿以挥干,再置 索氏提取器顶用甲醇100 ml回流提取4 h,放冷,提取 液过滤,置100 ml量瓶中,用少量甲醇荡洗烧瓶壁数 65115006.3079.E—mail:wuwerlfei2003@126 药学实行杂志2012年7月25日第30卷第4期 308 Journal of Pharmaceutical Practice,V01.30,No.4,July 25,201 2 次,洗液滤至上述量瓶中,定容,即得供试品原液。 2.2.3阴性比照液按处方制备不含小蓟药材的阴 性样品,按“2.2.2”项下步骤制备阴性比照液原液。 2.3步骤专属性试验慎密量取供试品原液、阴性 比照原液各3 ml,比照品贮备液2 ml,别离置10 ml Ixm 量瓶中,加甲醇稀释定容,旋匀,临用时,用0.45 测定,结果睹图1。 孔径针头滤器过滤,按“2.1”项下的色谱条款进样 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 0 2 4 6 8 10 12 14 16】8 20 O 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 t/min A t/min B t/min C 图1高效液相色谱图 A一比照品;B一供试品;C,阴性比照品;1一蒙花苷 2.4 线性联系窥探 慎密量取比照品贮备液 ml, 试一 0.30、0.60、1.00、1.50、2.00、3.00、5.00和10.0 别离置10 ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,旋匀,按 “2.1”项下色谱条款,测定峰面积,以蒙花苷溶液的 浓度C(I山g/m1)为横坐标,峰面积值A为纵坐标,进 行线性回归,得回归方程A=4.331×104 C一2.949 触一瞰㈣一m 率一率,一。4 8。9 一 豢一 ~ 艺』 ×103(n=5,r=0.999 9)。结果评释,蒙花苷正在 g{眦gi蛾m 7 4 玑 2.95—98.3斗g/ml局限内线性联系优秀,且外面板 数适当章程。 2.5慎密度试验取蒙花苷比照品溶液(29.5斗g/ m1),按“2.1”项下色谱条款测定6次,结果峰面积 的RSD为0.67%,注释仪器慎密度优秀。 2.6反复性试验称取统一批号的支扩养阴颗粒 6份,按“2.2.2”项下的步骤制备供试品原液,别离 慎密量取3.0 ml,置10 ml量瓶中,加甲醇稀释定 容,用0.45 I.Lm孔径针头滤器过滤,按“2.1”项下的 9。3 一骱㈨一鲫姐”∞ 立”彗∞ ”万冀”的笼冀笼 嚣翟 筮薹嚣蒌蚤 蔓蚤囊裂景仰 4。6 m呱叭m咿叭呲呲叭 3 6 2.9样品含量测定 取区别批号的供试品5批,按 条款进样测定,代入“2.4”项下的回归方程准备样 品含量,结果测得样品均匀含量为0.195 RSD为1.10%。可睹步骤的反复性优秀。 2.7安宁性试验取统一份供试品溶液,正在凉处放 置,与0、4、24、48、96 h依法测定,结果测得峰面积 的RSD为1.01%。评释供试液正在4日内安宁。 2.8加样接纳率试验 Ixg/mg, “2.2.2”项下步骤制备供试品溶液,作适合稀释,过 滤落伍样,按“2.1”项下的色谱条款测定,按外标峰 面积法和“2.4”项下的回归方程准备蒙花苷的含 量,结果睹外2。 外2支扩养阴颗粒含量测定结果(n=5) 慎密量取已知蒙花苷含量 15份,置 为0.195 Ixg/mg,制剂批号为20101201的支扩养阴 颗粒供试品溶液(100.855 mg/m1)2.00 ml 于10 ml量瓶中,分成3组,每组反复5份,别离精 密列入39.3 Ixg/ml蒙花苷比照液0.60、1.00、1.36 m1,加甲醇稀释定容,旋匀,按“2.1”项下的色谱条 件测定,准备接纳率,结果睹外l。 3 筹议 药学实行杂志2012年7月25日第30卷第4期 Journal of Pharmaceutical Practice,V01.30,No.4,July 25,2012 309 3.1 检测因素窥探支扩养阴颗粒含小蓟、麦冬和 色谱峰峰形欠佳,测定中有外面板数较低,经众次试 验,以甲醇一水一冰醋酸(55:44:2)为滚动相,不单 峰保存时光适宜、折柳度好,并且外面板数最高,峰 形相对最好。 3.3检测波长采选 较量了蒙花苷HPLC检测波 侧柏叶等药材,这些因素中有足够的黄酮类属物成 分,笔者已经检测出二氢黄酮类H。;有报道可检测 小蓟中芦丁。4。,含小蓟的制剂文献报道也以芦丁为 测定目标旧。,而正在笔者的试验推敲中,用紫外光谱 法和HPLC法均未测出。区别批次支扩养阴颗粒中 蒙花苷含量较量靠拢,注释小蓟中富含的黄酮是蒙 花苷,且含量较量安宁,可能将蒙花苷行动本制剂质 量负责订量目标之一。中邦药典一部2010年版与 2005版较量,正在薄层色谱鉴识中将芦丁”。修订为蒙 花苷。4。,含量测定项增订高效液相色谱法测定蒙花 苷…1,笔者推敲验证了这回增修订是确切、可行的。 长326 nm…和334 nmH’51处测得的峰面积,结果以 326 nm为检测波长峰面积大,故采选测定波长为 326 am。 【参考文献】 [1] 吴文飞.李玉平.紫外分光光度法测定支扩养阴颗粒中二氢 黄酮的含量[J].中邦药房,2011,22(43):4083. 3.2提取溶剂与提取步骤采选 已经采用石油醚 [2] 崔敬浩,杨星吴.丁安伟,等.小蓟、小蓟炭中黄酮类因素的含 量测定和薄层鉴识[J].四川中医,2006,24(3):32. (60~90℃)脱脂或不脱脂,以甲醇或65%乙醇为 提取溶剂,索氏提取器回流或超声提取,别离窥探所 制取的供试品溶液的色谱结果,试验评释经石油醚 回流脱脂,甲醇回流提取,所得供试品溶液与滚动相 有优秀的互溶性,色谱杂峰少,且提取最全体。 3.3滚动相采选窥探了甲醇-水.冰醋酸(55:45 :0.3),(45:54.5:0.5)‘“,(52:46:2)‘4 3和 [3] 祝德秋。罗启剑,崔岚,等.连钱草-小蓟同化粉中总黄酮的 含量测定[J].华西药学杂志,2003,18(6):477. [4]中邦药典2005版.一部[S]2005:32,45.308,295. [5] 柯睿,朱恩圆,翕桂新.小蓟的质料准则推敲[J].时珍邦 医邦药,2010,21(7):1662. [收稿日期]2011.12-03 [修回日期]2011.12-31 (55:44:2)等数组溶剂编制,结果前3组蒙花苷 (上接第290页) 外1样品含量测定结果及迁徙率(n=3) 一步亏损,但其迁徙率也可能到达78.7%~ 79.4%。由此可能占定,纵然黄芩苷的迁徙率较低, 但其震撼局限不大,注释扁咽口服液的出产工艺是 安宁实用的。 3.3纵然黄芩苷正在扁咽口服液的出产流程中迁徙 率较为安宁,但从药效因素的角度评判则相对偏低。 因而,按照黄芩苷的化学本质,可能采用其他适宜的 提取溶剂,抬高黄芩苷的迁徙率和含量,可能思虑将 扁咽口服液开荒成药效更好、用量更小、应用更简单 的颗粒剂的新剂型。 【参考文献】 [1] [2] 中邦药典2010年版.一部[S].2010:283. 雷芳.黄芩苷药理效用推敲开展[J].中邦药业,2010,19 (15):87. 迁徙率(%)=黄芩苷实测含量/溶液外面含量 ×100% 3 筹议 3.1采用HPLC法测定黄芩苷含量的报道较众,以 甲醇一水一磷酸的滚动相体例较为众睹¨。。。经奉推敲 较量涌现,采用甲醇一水-冰醋酸行动滚动相体例,可能 消浸磷酸惹起的基线震撼,较好杀青黄芩药材、扁咽 口服液中央品和制品中黄芩苷的检测。别的,通过比 较2%、1%和0.5%等区别浓度冰醋酸半数柳的影 响,涌现0.5%冰醋酸即能博得顺心的折柳成绩。 3.2 [3] 李玲玲,赵兰芬.清开灵区别制剂中黄芩苷的含量测定[J]. 药物领会杂志,201l,31(5):950. [4] 宋宗华,王鹏,陈晓辉,等.中药黄芩和一清颗粒中黄芩 苷HPLC定量领会步骤学验证参数控制窥探[J].药物领会 杂志,2010,30(6):1140. 中药制剂正在出产中服从既定的工艺举行制备, [5] 药材中因素的迁徙率大凡较为固定。从测定结果可 以看出,黄芩苷正在黄芩药材制成中央品的流程中转 移率为17.2%一19.0%,从中央品到制品流程中, 因为增加了壳聚糖举行澄清经管,形成黄芩苷的进 张捷,谭生修,王欢,等.高效液相色谱法测定赤子润 肺止咳151服液中橙皮苷和黄芩苷的含量[J].药物领会杂 志,2010,30(8):1451. [收稿日期]2012-01-03 [修回日期]2012-04-05?

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